کاربرد پیپت یا دیسپنسر آزمایشگاهی به طراحی سیستم آن و همچنین محدودیت‌های فیزیکی ذاتی خود آزمایش بستگی دارد. برای برآوردن الزاماتی چون دقت و صحت فرایند، در درجه اول به یک دستگاه دقیق و با کیفیت بالا و همچنین تجربه عملی کافی، جابه‌جایی صحیح مایع و یک پیپت تمیز نیاز داریم.
تکنیک های توزیع
تکنیک‌های توزیعی که بیشتر مورد استفاده قرار می‌گیرند عبارتند از نمونه برداری استاندارد (forward pipetting)، نمونه برداری معکوس (reverse pipetting)، توزیع، توزیع متوالی و رقیق سازی. پیپت های مکانیکی فقط برای نمونه‌برداری استاندارد و نمونه برداری معکوس مناسب هستند اما دیسپنسرهای الکترونیکی اغلب تمام عملکردهای فوق را پوشش می‌دهند.
انتخاب روش توزیع مناسب در هر مورد تاثیر قابل توجهی بر نتایج آزمایش دارد. روش نمونه‌برداری
استاندارد برای محلول‌های آبی که حاوی غلظت کم پروتئین یا مواد پاک‌کننده هستند مناسب است. مرطوب کردن نوک پیپت قبل از نمونه‌برداری، نتیجه آزمایش را بهبود می‌بخشد. همچنین توزیع مایعات چسبناک (با ویسکوزیته بالا) یا کف‌دار یا توزیع نمونه‌های بسیار کوچک، با روش نمونه‌برداری معکوس نتایج آزمایش را به میزان زیادی بهبود می‌دهد.
در طی فرآیند توزیع، مایع در مراحل مشخص توزیع می‌شود. این تکنیک اغلب هنگام پردازش سری آزمایش‌های طولانی یا پر کردن ظرف‌های میکروتست استفاده می‌شود. در توزیع متوالی، حجم‌های مختلف یک محلول یکی پس از دیگری در یک توالی مشخص توزیع می‌شود. این تکنیک اغلب در فرآیندهای سرولوژیک و کاربردهای مشابه استفاده می‌شود.
هنگام رقیق کردن مایعات ابتدا یک حجم اولیه و سپس یک حباب هوا و حجم دوم نمونه‌برداری می‌شود. سپس هر دو حجم در یک مرحله توزیع می‌شوند. این تکنیک توزیع در مقایسه با آسپیراسیون و توزیع دو مرتبه‌ای با پیپت‌های دستی – به ویژه در حجم‌های قابل توجه و پیپت های چندکاناله – باعث افزایش کارایی می‌شود.
استفاده بهینه از پیپت های دستی
صرف نظر از روش توزیع مورد استفاده، موارد زیر باید در حین نمونه‌برداری در نظر گرفته شوند:
- در این نوع پیپت، نوک باید به گونه‌ای به کار گرفته شود که هوای بین پیستون و سطح مایع تا حد امکان کم باشد. هرچه نوک کمتر در مایع فرو رود، حجم هوا کمتر می‌شود و دقت نتایج بیشتر خواهد بود.
- هنگام آسپیراسیون مایع، نوک فقط باید چند میلی‌متر در سطح مایع غوطه‌ور شود.
- نوک پرشده باید از کناره ظرف به سمت بالا بیاید تا هیچ مقدار مایعی در قسمت بیرونی نوک باقی نماند.
- قبل از حجم برداری، دو یا سه بار نوک پیپت را مرطوب کنید تا دقت و صحت نتایج بهبود پیدا کند.
- مایع باید به آرامی و یکنواخت به داخل کشیده شود.
- 1 تا 3 ثانیه صبر کنید تا مایع در نوک تیپ بالا بیاید.
در حین آسپیراسیون، دستگاه باید به صورت عمودی نگه داشته شود. هنگام آسپیراسیون مایع،
فشار هیدرواستاتیک ستون مایع در نوک با افزایش زاویه شیب، کاهش می‌یابد. این مورد منجر به افزایش حجم آسپیراسیون می‌شود.
انحراف در حجم را برای هر نمونه‌برداری با هر زوایه شیبی می‌توان تخمین زد. در زاویه 45 درجه نسبت به سطح عمودی، حجم اضافی یک پیپت 1000 میکرولیتر، 2.9 میکرولیتر یا 0.29٪ است. برای یک پیپت 100 میکرولیتری در زاویه 60 درجه نیز، حجم اضافی 0.53 میکرولیتر یا 0.53 درصد خواهد بود.
افراد مختلف دقیقا یک حجم یکسان را با پیپت مشخص نمونه‌برداری نمی‌کنند و این موضوع به خاطر عواملی مانند زوایای مختلف پیپت در هنگام نمونه‌برداری مایع است. اگرچه تاثیر این مسئله در هر نمونه کم است اما زمانی که همه عوامل مختلف با هم جمع شوند، خطا ممکن است بسیار بیشتر باشد.
می‌توانید در مقالات زیر:
اطلاعات بیشتری در خصوص پیپت کسب کنید.
خدمات کالیبراسیون شرکت سنجشگران میزان ابزار ضمن بهره‌مندی از تجهیزات مرجع با قابلیت ردیابی به استانداردهای بین‌المللی و اندازه شناسی دقیق، بر اساس گستره عملکردی، گواهینامه تایید صلاحیت و استانداردهای ملی و بین‌المللی خدمات خود را توسط کارشناسانی مجرب ارائه می‌دهد. ما را در
لینکدین ذنبال کنید.
